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4%多聚甲醛固定细胞时间
分钟。多聚甲醛通常用于生物医学领域的标本固定过程中,4%多聚甲醛固定细胞时间保持在15分钟即可,要注意的是多聚甲醛有毒,只能在通风橱中使用。
需要。一般在4度固定24到48小时即可,固定时间因组织而异。4%的多聚甲醛代理可以固定标本不能超过48hours,固定时间太久组织会变脆。
固定细胞:将12孔板放置在室温下,让细胞在多聚甲醛溶液中固定15分钟到30分钟,具体时间取决于细胞类型和实验要求。固定过程中,多聚甲醛会与细胞内的蛋白质发生交联反应,使细胞结构得以保持。 去除固定液并清洗:固定完成后,吸去多聚甲醛溶液,并用PBS清洗细胞2-3次,以去除残留的固定液。
固定:加入4%多聚甲醛(PBS配制)固定20分钟。如暂时不能立即做组化检测,使用含0.4%多聚甲醛的PBSPH4浸泡细胞(免疫组化检测完成前不要让细胞变干,否则细胞收缩形态不好)。除去多聚甲醛,使用PBS轻洗细胞3×3min。
植物根茎组织不可以一直放在4%多聚甲醛里固定保存。根据查询多聚甲醛产品使用说明得知,使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48小时,固定时间太久组织会变脆,如果是在温度4度以下最多可以放一个月,所以植物根茎组织不可以一直放在4%多聚甲醛里固定保存。
细胞表面的抗原,一般是4%的多聚甲醛在抗体染色完成后固定15分钟。如果是染胞内抗原,则是固定通透完成后再染色。
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